AmpC酶的产AmpC菌株的检测

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1)头孢西丁敏感试验:AmpC酶可以水解头孢西丁(FOX),即产AmpC酶的菌株对头孢西丁耐药。而超广谱β内酰胺酶(ESBLs)等其他β内酰胺酶一般不能分解头孢西丁,即产ESBLs的菌株对头孢西丁敏感。利用AmpC酶的这一特性,可以对产AmpC酶的菌株进行初步筛选。

2)三维试验:三维试验也是利用AmpC酶可以水解头孢西丁的原理,先用冻融法或超声粉碎法将待检菌株中的β内酰胺酶提取出来(粗提),观察这种酶的粗提物对头孢西丁的抑制情况。如果粗提物中有AmpC酶存在,即可抑制头孢西丁的活性,使其周围对头孢西丁敏感的大肠埃希菌得以生长;反之,大肠埃希菌受头孢西丁的抑制则不能生长。

AmpCβ内酰胺酶(简称AmpC酶)是由肠杆菌科细菌或(和)绿脓假单胞菌的染色体或质粒介导产生的一类β内酰胺酶,属β内酰胺酶Ambler分子结构分类法中的C类和Bush-Jacoby-Medeiros功能分类法中第一群,即作用于头孢菌素且不被克拉维酸所抑制的β内酰胺酶。故AmpC酶又称作为头孢菌素酶。

1 AmpC酶的分类

AmpC酶按其产生的方式3类:诱导高产酶、持续高产酶和持续低产酶。

1.1 诱导高产酶 AmpC酶的合成往往与β-内酰胺类抗生素的存在有关。绝大部分肠杆菌科细菌和绿脓假单胞菌在正常条件下(即无β内酰胺类抗生素存在的条件下)只产生少量的AmpC酶。而当有诱导作用的β内酰胺类抗生素存在的条件下,AmpC酶的产量明显增加,增加的范围在100~1000倍之间。

1.2 持续高产酶 另有一部分产AmpC酶的菌株不论在有无β内酰胺类抗生素存在的条件下均可持续高水平产生AmpC酶,其原因为去阻遏突变,即调控基因之一的ampD基因发生突变,产生的有缺陷的AmpD蛋白,而不能与另调控蛋白-AmpR蛋白结合形成复合物,AmpR蛋白即以激活子状态发挥激活作用,引起AmpC酶的大量表达。质粒介导的AmpC酶往往都属于此类AmpC酶。产生种AmpC酶的细菌对临床的危害最大,是临床微生物实验室检测的重点。

1.3 持续低产酶 还有极少部分产AmpC酶的菌株,不论在有无β内酰胺类抗生素的存在的条件下均持续低水平的产生AmpC酶,其原因可能是另一种调节基因-ampR基因发生突变,产生有缺陷的AmpR蛋白,不能在无β内酰胺类抗生素存在的条件下起到抑制子的作用,也不能在有β内酰胺类抗生素存在的条件下起到激活子的作用,故AmpC酶得以持续低水平地表达。

2 AmpCβ内酰胺酶的检测方法

检测不同类型的AmpC酶或检测产不同类型AmpC酶的菌株,其方法也有所不同。已陆续报道了多种检测AmpC酶的方法,除改良的三维试验较为经典外,其他的检测方法还不成熟,尚在摸索,试验阶段,检测的结果也各不相同。现讲述如下。

2.1 头孢西丁敏感试验AmpC酶可以水解头孢西丁(FOX),即产AmpC酶的菌株对头孢西丁耐药。而超广谱β内酰胺酶(ESBLs)等其他β内酰胺酶一般不能分解头孢西丁,即产ESBLs的菌株对头孢西丁敏感。利用AmpC酶的这一特性,可以对产AmpC酶的菌株进行初步筛选。

具体操作方法:(1)纸片扩散法:按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)的纸片扩散(K-B)法进行。FOX纸片的含量为30μg。判断标准为抑菌环<18mm,表示待检菌株对FOX耐药。(2)稀释法:手工的(微量)肉汤稀释方法参照NCCLS的方法进行;也可用MicroScan等微生物分析仪进行分析,操作方法按其操作规程进行。判断标准为MIC>16μg/ml表示待检菌株对FOX耐药。对FOX耐药的菌株,应怀疑产AmpC酶可能。但是Coudron等利用该标准检测肺炎克雷伯菌,大肠埃希菌和奇异变形杆菌AmpC酶时发现28株头孢西丁抑菌环<18mm的肺炎克雷伯菌中,只有4株产AmpC酶,有2株产AmpC酶的大肠埃希菌的抑菌环分别为17mm和18mm。故此方法仅仅作为初步筛选。需做三维试验或纸片协同试验等试验,进行进一步的确定。

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    努力啊大智勇 2025年09月02日

    我是海宁号的签约作者“努力啊大智勇”

  • 努力啊大智勇
    努力啊大智勇 2025年09月02日

    本文概览:网上有关“AmpC酶的产AmpC菌株的检测”话题很是火热,小编也是针对AmpC酶的产AmpC菌株的检测寻找了一些与之相关的一些信息进行分析,如果能碰巧解决你现在面临的问题,希望...

  • 努力啊大智勇
    用户090208 2025年09月02日

    文章不错《AmpC酶的产AmpC菌株的检测》内容很有帮助